Biblioteki

 0    13 schede    magdapawlowska45
Scarica mp3 Stampa Gioca Testa il tuo livello
 
Domanda Risposta
biblioteka genomowa
inizia ad imparare
zbiór fragm chromosomalnego i oranelarnego DNA org umieszczonych w okr wektorach (wielkość zal od met i przygorowania DNA)
bibloteka cDNA
inizia ad imparare
analogiczny zbiór fragm DNA powstałych na matrycy mRNA poprzez odwrotną trankrypcję (wielkość fragm zal od długości mRNA i metody)
Biblioteka cDNA liczebność
inizia ad imparare
liczebność zależy od poziomu transkrypcji poszukiwanego genu – udział w puli cDNA
Biblioteka znormalizowana
inizia ad imparare
zawiera wyrównanie liczebności cDNA poszczególnych genów
Reakcja chemiczna II-rzędu
inizia ad imparare
r=k[A][A]=k[A]2 r- szybkość rcji [A]- stężenie substratów tu nić DNA
Normalizacja bibliotek cDNA
inizia ad imparare
mniej więcej równa reprezenacja licznych i mniej licznych transkryptów
Wytrącanie cząsteczek kw nulk z roztworów
inizia ad imparare
Biotynę można dodać do czapeczki lub startera, streptamidyną pokryte są kulki metalowe i można te cząsteczki wytrącić z roztworu bo one razem się prawie magnetycznie łączą
Wytrącanie cząsteczek kw nulk z roztworów i zależność szybkości od stężenia
inizia ad imparare
Jeżeli mamy duże stężenie obydwu nici to reakcja renaturacji przebiega szybciej. Jak małe to o wiele wolniej
przeglądanie różnicowe (differential screening)
inizia ad imparare
w stos dużym zbiorze klonów (bibl) wyszukiwanie pojedynczych klonów, które ulegaja ekspresji tylko w jednej ze sprawdzanych tk (organi, stanie fizjol)
Subtrakcja (subbtraction)
inizia ad imparare
(tworzenie bib subtrachowanej) masowe i automatyczne
Standardowe przeglądanie biblioteki
inizia ad imparare
• zwykła bibl cDNA (z mRNA +): poszukiwanie gł klonów indukowanych • wysiew bibl i odciski replik na filtrach • konstrukcja sond molek + i – cDNA i hybrydyzacja
Cold plaque screening -, przeglądanie zimnych łysinek” (virtual subtraction)
inizia ad imparare
• bibl cDNAA z mRNA + nie trzeba replik odcisków • sonda z mRNA - • ciekawe są te łysinki które nie hybrydyzują
dotblot z cDNA z tkanki (zal od stężenia)
inizia ad imparare
jak go jest dużo to pojawia się w postaci ciemnej plamki. Izoluje się taką sekwencję i mnoży PCR. Umożliwia też sklonowaie genów o niskim poziomie ekspresjii

Devi essere accedere per pubblicare un commento.